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核酸电泳相关试剂配制方法

发布时间: 2022-06-23 10:34:00

试剂名称及定量

配制方法

备注

50×TAE Buffer (pH8.5)

配制量:1L

称量342g Tris、37.2gNa2EDTA∙2H2O 置于1L烧杯中,加入800mL 去离子水,充分搅拌溶解,加入57.1mL醋酸,充分搅拌。定容至1L,室温保存。

 

50×TBE Buffer (pH8.3)

配制量:1L

称量108gTris、7.44gNa2EDTA∙2H2O 、55g硼酸置于1L烧杯中,加入800mL 去离子水,充分搅拌溶解;加入57.1mL醋酸,充分搅拌。定容至1L,室温保存。

 

10×MOPS Buffer

配制量:1L

称量41.8g MOPS ,置于1L烧杯中,加约700mL DEPC处理水,搅拌溶解,使用2M NaOH调pH值至7.0,再加入20mL1M CH3CONa(DEPC处理),20mL0.5M EDTA(pH 8.0)(DEPC处理),用DEPC处理水定容至1L,0.45µm滤膜过滤除菌,室温避光保存。

溶液见光或高温灭菌后会变黄,变黄时也可使用,但变黑时不可使用。

溴化乙锭(EB)10mg/mL

配制量:100mL

称取1g溴化乙锭,加100mL 去离子水,用磁力搅拌器搅拌直至完全溶解。将溶液转移至棕色瓶中,室温避光保存。工作浓度为0.5µg/mL

溴化乙锭是致癌物质,须小心操作。

6×Loading Buffer (DNA电泳用)

配制量:500mL

称取4.4 g EDTA、250mg Bromophenol Blue、250mg Xylene Cyanol FF,置于500mL烧杯中,加入约200mL去离子水,加热搅拌充分溶解,再加入180mL甘油,用2N NaOH调pH至7.0,加去离子水定容至500 mL,室温保存。

 

10×Loading Buffer(RNA电泳用)

配制量:10mL

称取 200µL 0.5M EDTA (pH8.0)、25mg Bromophenol Blue、25mg Xylene Cyanol FF,置于10mL离心管中,向烧杯中加入约4mL DEPC处理水,加热搅拌充分溶解,再加入5mL甘油,充分混匀,加入DEPC处理水定容至10 mL,室温保存。

 

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